目的:除去溶劑、水分、以及色譜柱制備過程中其他揮發(fā)性雜質(zhì);促進固定液均勻牢固的分布在擔體上。
(1)老化溫度的選擇應注意:足夠高以除去不揮發(fā)物質(zhì);足夠低以延長柱壽命和減少柱流失;溫度越低老化時間應越長;不超過色譜柱的最高使用溫度。
(2)填充柱比毛細管柱應更經(jīng)常、更嚴格的老化。
(3)填充柱老化時間應長些,可過夜;毛細管柱老化只能是輕度的,時間應短些,防止固定液流失。
(4)老化好的色譜柱若不立即投入使用,應將其從柱箱中取出,兩端蓋上帽子,防止空氣、水分或其他雜質(zhì)的進入。
色譜柱的再生:
1、反相柱的再生。采用以甲醇:水=95:5(V/V),純甲醇,二氯甲烷等溶劑作流動相,順次沖洗,每種流動相流經(jīng)色譜柱的量為20一30倍色譜柱體積然后再以相反順序沖洗色譜柱。
2、正相柱再生。順次以正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇作流動相沖洗色譜柱每步注意平衡溶劑的順序,不要顛倒每種流動相流經(jīng)色譜柱的量為20—30倍柱體積,用甲醇沖洗完后,再以相反的順序沖洗色譜柱。要注意上述溶劑必需嚴格脫水。
3、離子交換柱的再生。長時間在高pH值和高離子強度緩沖溶液中使用,將導致色譜柱離子交換能力降低。用稀酸緩沖溶液沖洗,可使陽離子柱再生;反之,用稀堿緩沖溶液沖洗,可使陰離子柱再生。